人心，是一门深奥的科学。人会犯罪作恶，皆因被贪婪、愤怒、软弱和嫉妒等情绪支配。为了逃避刑责，人会利用谎言掩饰真相，用诡计扰乱视线，令法证工作难上加难。未破的悬案、消失的证据、迷失的困局，都是法证团队面对的一个个难关。纵然过程中会受到打击，但他们都会坚持初心，跌倒之后重新出发，不会放弃追寻真相。 《法证先锋V》的案件和布局更加让人意想不到，唯有靠着“法证部”、“法医科”及“重案组”这灭罪铁三角，秉承前四季的理念，通力合作，找出真凶，还生者公道，替死者雪冤。
八十年代，歌女朱莎娇(米雪饰)独自带着孪生女儿在流浮山生活，可惜一对女儿长大后却为爱情决裂。莎华离家出走，莎莎难产逝世，莎娇从此肩负照顾外孙女君好的重任，以及收养了哑巴小男孩文初。时光荏苒，君好(何依婷饰)生父祝展辉(海俊杰饰)的出现，令莎娇、莎华(姚嘉妮饰)和君好这三代关系，再次陷入爱恨纠缠之中。文初(胡鸿钧饰)、君好与年青有为的司徒礼信(罗天宇饰)因缘分结为好友，渐渐让兄妹间泛起超乎亲情之爱，更牵进三角虐恋，无法抉择，唯有以牺牲和无私奉献，成就挚爱的幸福...
民初上海滩 群雄逐鹿 十里大洋场 仇杀不休 三十年代，叱吒上海黑道二十多年的聂进(苗侨伟)在妻子横死后退下战线，经营起小笼包店来，并出於歉疚而聘请了何水秀(向海岚)。进的退隐，叫一心跟随他的石世九(黄宗泽)失望不已。 进本没有打算重出江湖，但是当他知道黑帮兄弟胡大川可能跟妻子之死有关，并且眼看著其他兄弟逐一遇害时，他知道江湖事终究要以江湖手段来解决。 进和川因而展开了连场廝杀；然而其后一连串事件，叫进怀疑背后还有黑手。另方面，更叫他震惊的是，女儿曼华(杨思琦)的亲生父亲，原来竟是对他恩重如山的大亨顾长城(高雄)……
面对一个个错综复杂的悬疑案件，法证部高级化验师余星柏（黄宗泽 饰）、重案组高级督察井浩然（袁伟豪 饰）、法医科高级医生范佩清（蔡洁 饰）三人团将如何一步步抽丝剥茧，在危机四伏的谜团中，用科学揭露事实寻觅真相？在面临生死时，他们又将如何坚守本心，完成对自我和他人的救赎？一切答案都将在本季剧集中揭晓。
能够成为一名对社会有用的人一直都是张志杰（梁朝伟 饰）的理想，长大成人后，充满了正义感的他选择成为了一名警察。在与女友谢颖芝（张曼玉 饰）分手后，志杰接受了林佩贤（黄造时 饰）的追求，两人走到了一起。 倪峰（刘青云 饰）是志杰的师兄，一次意外中，由于志杰的疏忽，倪峰遭遇 了车祸身负残疾，自暴自弃的他离开了警队，淡出了众人的视线。志杰有一同父异母的兄弟名为家明（戴志卫 饰），与志杰是同行，最近，家明因被卷入一宗诈骗案之中而遭到了追杀，杀手不是别人，正是消失已久的倪峰。家明死了，凶器竟然是志杰的配枪，志杰因此亦被卷入案中。为了证明自己的清白，志杰开始了对案件的调查。
特技演员程郎（黎明 饰）幼时与父亲程孝全（刘兆铭 饰）不和，负气去了台湾独自生活，妹妹程虹（杨美仪 饰）借来台湾找老同学沈文薏（周海媚 饰）的机会想让哥哥回香港。在妹妹的说动下，老婆跑路独自带着儿子的程郎终于回到了香港，回家后的程郎重逢童年伙伴高天俊（温兆伦 饰），并很快与一名越南难民展翘（邵美琪 饰）发展出刻骨铭心的恋情，可展翘最终选择离开香港，两人幸好失落之余沈文薏的出现让程郎看到一丝曙光。与此同时，程郎不知道妹妹已经爱上了高天俊，而高天俊却爱着文薏，被横刀夺爱的他渐渐开展了一系列丧心病狂的报复手段，一团乱麻之际展翘回港，程郎陷入了剪不断理还乱的三角关系中。
方芷湄（梅艳芳 饰）原本是出生在富贵之家的千金小姐，却不幸遭遇家道中落的惨剧，母亲为了维持生计无奈外出打工，方芷湄为了减轻母亲的辛劳也开始工作，在机缘巧合之下结识了名为宇深（苗侨伟 饰）的富家公子，两人之间牵扯出了一段难解的情缘。 在好友小杜鹃（景黛音 饰）的介绍下，方芷湄来到了夜总会成为了一名歌女。凭借着美丽的外表和动人的嗓音，方芷湄很快就成为了舞场中的头牌。贝婷婷（蒋丽萍 饰）是方芷湄的同学，她见方芷湄和宇深之间走的很近，于是想方设法的接近两人，想要获得宇深的心，嫁入豪门成为阔太。
为人正直、医术高超的精神科医生高立仁（方中信 饰），治疗患者很有一套自己的方法。他除了传统的诊断外，还会根据病人的心理，分析其病源。在专业内处理的得心应手的立仁，在感情方面则很笨拙。少年时期的不经事，立仁和其女友未婚先孕，孩子生下来后不久，立仁就和妻子离了婚。之后，立仁就一心扑在了工作上。还好周围有医生志森（蒋志光 饰）和护士应春（黄浩然 饰），这二位好友和知己陪伴，立仁的日子倒也不算寂寞。直到某次处理事情，和重案组的探员莫敏儿（徐子珊 饰）邂逅，让立仁再次感受到了恋爱的召唤，一来一往中，立仁和敏儿互生情愫。 但敏儿却很困扰，她患有家族遗传病，在乐观的外表时，潜伏着厌世的消极心态。于是敏儿不得不回避自己的真实感受，拒绝了立仁……
雷文凤（万梓良 饰）的母亲因为遭到了庸医的误诊而遭遇了活活被烧死的悲惨命运，当时年幼的雷文凤目睹了一切，幼小的心灵萌受了巨大的伤害。自此之后，雷文凤和父亲雷崭之间的关系急转直下，他的性格也因此而变得乖僻又古怪。 长大之后，雷文凤远赴美国攻读医学，并凭借着优异的成绩荣归故里，成为了一名脑科医生。可是，他的性格和为人处世的方式却成为了职业生涯中最大的绊脚石。虽然雷文凤常常成为众人非议的对象，但他杰出的医术却深受患者和同事的信赖。叶敏（萱萱 饰）是雷文凤的女友，同时亦是一名护士。一次偶然中，一宗二十年前发生的谋杀案重新浮出水面，改变了雷文凤的一生。
富家子田伟晨（张家辉 饰）是家中独子，却从来不过问家族生意，一副纨绔子弟模样的他与父亲田立光的关系一直不好。天有不测之风云，家中破产，伟晨失去了所有，身边的所有异性都离开了他，让他深觉女人都是贪慕虚荣的。 失意的伟晨登上了邮轮散心，他遇到了同样失意的方雅文（张可颐 饰）。一番了解后，伟晨被雅文的气质深深吸引，雅文也不介意伟晨的现状，伟晨倍受感动。原来雅文一直受家中父母的影响对爱情充满了期待，怎料在结婚前男友竟然逃婚了。起初雅文只觉得伟晨是个替代品，但经过了一系列浪漫相处后，两人在船上迅速结婚。 但两人后来却因为误会而离婚了，离婚后的两人各散东西，不久却在一间旅游公司再次碰面了，成为了一对斗气冤家，公事上针锋相对，而两人背后各有后盾。 伟晨意外发现自己与雅文的离婚手续还没有弄清，害怕自己随时被雅文追讨赡养费，他把前妻介绍了旧同学刘华，原来刘华是存心欺骗...
